细胞膜绿色荧光探针(DiO)

产品货号：

KFS153

中文名称：

细胞膜绿色荧光探针(DiO)

英文名称：

DiO

产品规格：

10mg

发货周期：

1～3天

产品价格：

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长链二烷基羰花青化合物广泛应用于固定和非固定的组织与细胞中，进行顺行或逆行的神经示踪分析。

产品组成

保存：-20℃，避光，有效期1年。

注意事项

制备储液
固体染料以DMF或者DMSO或乙醇溶解配制为1mM的储液。对于DiO(MW:882)来说，优选DMF作为溶剂。一旦制成的储液，需避光冷冻，储液形式可保存6个月。
标记悬浮细胞
1. 以无血清培养基悬浮细胞密度为1×10⁶个/mL。
2. 每1mL细胞悬液加入5μL细胞标记液，混匀。
3. 37℃孵育1～20分钟。不同的细胞类型所用的孵育条件不一样，可参考表格1.初始孵育时间可选择20分钟，随后再进行优化。
4. 37℃，1500rpm 5分钟离心标记悬浮液。
5. 去上清，用37℃的培养基轻轻重悬细胞。
6. 重复两次以上的洗涤步骤。
7. 放置10分钟后进行荧光测量。
标记贴壁细胞
1. 培养皿中放置干净的盖玻片，使细胞爬片至所需的汇合度。
2. 取出爬片，用滤纸吸去爬片边缘多余培养基，将盖玻片放到湿盒中。
3. 准备标记，每1mL新鲜培养基中加入5μL的标记液。
4. 吸取100μL标记液从边角处滴加在盖玻片周围，轻轻晃动铺匀，使之盖满整个爬片。
5. 37℃孵育细胞，不同的细胞类型所用的孵育条件不一样，可参考表1.初始孵育时间可选择20分钟，随后再进行优化。
6. 去掉染色介质，用新鲜预热的培养基孵育10分钟，再更换以新的预热的培养基孵育10分钟，重复洗涤盖玻片三次。

表1.优化的细胞染色孵育时间

表2.DiO,DiI,DiD and DiR光谱特性

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